固相萃取柱操作问题
1、装柱柱子下的活塞避免使用润滑剂,以免被淋洗剂带到产品中。干法和湿法装柱区别较小,只要能把柱子装实即可。装柱前应仔细观察固相萃取柱是否开裂,避免影响分离效果,装柱应该要适度紧密(太紧密淋洗剂流速太慢,太疏松淋洗剂流速过快)、均匀(避免样品从一侧斜着流出),避免过柱时出现大量的气泡。
2、加样用少量的溶剂溶样品加样,打开活塞,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此三次,一般石英变成白色。加入淋洗剂后不可立即加压,等溶样品的溶剂和样品层有分开2cm~4cm,再加压,这样可以避免溶剂夹带样品快速下行。
3、样品的收集用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡过程。如果样品与硅胶的吸附较强,样品解析较慢。这样就会出现后面的点先出,而前面的点后出的现象,这时可以采用氧化铝作固定相。另外,收集的试管大小要以样品量而定,特别是小量样品,如果用大试管,可能一根就收到了多个样品,如果都用小试管,缺点是工作量太大。
4、处理萃取柱分离后,氨基固相萃取柱哪家好,由于使用了大量的溶剂,其中的杂质也会积累到所需组分中,必要时进行重结晶。另外,过柱时有时会出现气泡,这可能存在两种原因:一是这与使用的溶剂类型有关,如果是易挥发的溶剂,在室温稍高的情况下,很容易出现这种现象。因此,在室温高的时候,应该选择沸点较高,海南固相萃取柱哪家好,挥发性相对小的溶剂。使用混合溶剂时,C8固相萃取柱哪家好,使用的两种溶剂的沸点相似。二是在装柱之前,柱内可能存有少量空气,必须用加压的方式将空气排干,这样就可避免柱中存有空气。
固相萃取柱介绍
固相萃取装置是一种被广泛应用且备受欢迎的样品前处理技术,就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。它在传统的液-液萃取基础上采用物质间相似作用的相似相溶原理并结合目前广泛应用的液相色谱和气相色谱固定相基本知识发展而来。
固相萃取柱的使用步骤
步骤一:预处理萃取柱。
在萃取样品之前,为了湿润固相萃取柱填料,用一满管溶剂冲洗管子。反相类型硅胶和非极性吸附剂介质,通常用水溶性溶剂预处理,然后用水或缓冲溶液。湿润吸附剂表面和渗透键合烷,以允许水更有效地湿润硅胶表面。有时前预处理溶剂使用之前。这些溶剂通常是与洗脱溶剂一样,228固相萃取柱哪家好,是用之消除固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰,也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。
步骤二:加入样品。
将样品装入萃取柱,此时,固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样,当样品流出时,所选择的化合物(包括杂质)被留在萃取柱上。
步骤三:冲洗填料。
用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。
步骤四:洗脱感兴趣的化合物。
用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。
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