福建庆大霉素ELISA试剂盒 北京中检维康

ELISA试剂盒主要实验原理

·包被：抗原或者能以物理性吸附于固相载体表面，原因是蛋白质和聚乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，吸附之后能保持抗原反应等活性；

·标记：抗原或者可通过共价键与酶连接成酶结合物，庆大霉素ELISA试剂盒厂家，而此种酶结合物仍能保持其活性和酶的催化特点；

·显色：酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者结合后，也被固定在固相载体上，加入酶的底物之后可出现显色反应，根据反应的颜色深浅可计算抗原或者的相对含量。

Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案

背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值ODlt;0.2）

1 洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留 洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，庆大霉素ELISA试剂盒多少钱，拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染。

2 底物污染，未避光保存，出现颜色 弃去底物，重新配置

3 样品稀释液污染 弃去稀释液，重新配置

4 吸头重复使用，庆大霉素ELISA试剂盒报价，未洗净或消毒不 吸头尽可能一次性使用

5 不正确的孵育时间，温度（尤其是底物孵育的时间） 常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。完全按照说明书要求。

6 偶联抗体（streptavidin-HRP）浓度过高 按照说明书调整到合适的浓度

7 ELISA板子不正确的贮存 酶标板贮存于2-8 ℃；使用结合力低点的Elisa板

8 没有正确封闭 在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间

9 样本溶血严重 建议使用非溶血或轻微溶血样本，严重溶血样本会导致背景偏高。

ELISA试剂盒的应用技术

ELISA检测试剂盒应用定性夹心检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM，这些就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与孵育结合上的HEV IgM相结合，洗板除去未结合的酶结合物，福建庆大霉素ELISA试剂盒，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值，按照本HEV IgMelisa试剂盒的测试标准， O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。