ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应，所以任何的诊断剂离不开好的原料，如抗原，酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原，而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的，而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，山东沙丁胺醇ELISA试剂盒，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定方法也不断出现。
ELISA试剂盒主要实验原理
·包被：抗原或者能以物理性吸附于固相载体表面，原因是蛋白质和聚乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，吸附之后能保持抗原反应等活性；
·标记：抗原或者可通过共价键与酶连接成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其活性和酶的催化特点；
·显色：酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者结合后，沙丁胺醇ELISA试剂盒哪家好，也被固定在固相载体上，加入酶的底物之后可出现显色反应，根据反应的颜色深浅可计算抗原或者的相对含量。
ELISA试剂盒的测试要求
做好对照
正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应。
实验条件的选择
在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
（1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，沙丁胺醇ELISA试剂盒多少钱，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被（或抗原）的选择：将（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响，一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。
（3）酶标记工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
（4）酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，沙丁胺醇ELISA试剂盒公司，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。
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