Elisa试剂盒操作步骤
1、固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。
2、包被或抗原的挑选:将或抗原吸附在固相载体表面时,卡那霉素ELISA试剂盒供应商,要求纯度要好,玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒供应商,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。
3、 酶标记作业浓度的挑选:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法",在正式试验体系里准确地滴定其作业浓度。
4、酶的底物及供氢体的挑选:对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。
Elisa试剂盒的安全性
8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
2. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
3. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,陕西ELISA试剂盒供应商,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
4. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
5. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
ELISA试剂盒的应用技术
ELISA检测试剂盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,黄曲霉毒素ELISA试剂盒供应商,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
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