亲和柱原理介绍
亲和层析(IAC)可称为色谱技术,是一种利用抗原特异性可逆结合特性的SPE技术,维生素B12亲和柱哪家好,根据抗原的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将抗、惰性微珠共价结合,然后装入小柱,天津亲和柱哪家好,将被测溶液流过亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,然后用洗脱缓冲液洗脱抗原(被测物),从而得到纯化的抗原(被测物),收集的抗原样品液可直接用于 HPLC 分析或处理后用荧光光度计检测。
亲和柱亲和层析过程中的注意事项
1、上样
亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,兽药残留亲和柱哪家好,包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等,T2毒素亲和柱哪家好,以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。
2、洗脱
亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种:特异性洗脱和非特异性洗脱。
亲和柱适用注意事项
(1) 呕吐毒素对人体有害,应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次酸钠浸泡过夜。
(2) 不要使用过有效期的亲和柱。
(3) 亲和柱应在2~8℃保存。不要冷冻。
(4) 使用前,亲和柱需至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。
(5) HPLC液相测定值、试剂盒计算值接近zui高检出值时,样本的实际含量可能大于柱容量而造成流穿,建议减少上样体积重新过柱。
(6) 称取的样品量以及提取液的体积可根据实际情况按比例调整,建议不少于10g样。
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